Valutazione della correlazione tra uso di sostanze psicoattive e indicatori di metilazione del DNA e danno ossidativo agli acidi nucleici in popolazione sottoposta a stress ; Assessment of the correlation between the use of psychoactive substances and DNA methylation indicators and oxidative damage to nucleic acids in stressed population

Le interazioni di sostanze xenobiotiche e sostanze reattive dell'ossigeno (ROS) con gli acidi nucleici possono portare alla rottura dello scheletro strutturale delle basi azotate e a loro modifiche chimiche; lo squilibrio fra la produzione dei ROS e i meccanismi di difesa antiossidanti dell'organismo, a favore della reazioni di ossidazione, viene definito come stress ossidativo. Esso è stato associato alla patogenesi ed al peggioramento di varie malattie, legate principalmente all'età, tra cui infarti, patologie cardiovascolari, malattie neurodegenerative, diabete e invecchiamento precoce. Gli effetti sul DNA rivestono una fondamentale importanza in ambito biomedico in quanto possono generare errori di appaiamento di basi durante la replicazione, risultando potenzialmente mutageni. Tra le basi del DNA e dell'RNA, la guanina è quella più facilmente esposta all'attacco del ROS idrossile, in particolare in posizione 8, mentre la citosina viene metilata in posizione 5. La peculiarità di queste modifiche è quella di impedire l'appaiamento nella replicazione del DNA formando appaiamenti errati. Il presente studio ha come obiettivo la valutazione della correlazione tra uso di sostanze psicoattive e indicatori di metilazione del DNA e danno ossidativo agli acidi nucleici in una popolazione in terapia con metadone, sottoposta a stress sostanza-correlato, in due differenti matrici: urina e saliva. Lo sviluppo della parte sperimentale ha previsto la raccolta di campioni biologici da due popolazioni diverse: 1) per quanto attiene alla matrice urinaria, le analisi sono state svolte su 39 campioni di soggetti deceduti in età adulta, di entrambi i sessi, senza malattie associate a ossidazione o metilazione degli acidi nucleici. Le analisi sono state svolte mediante utilizzo di cromatografia liquida accoppiata a spettrometria di massa: i campioni di urina, dopo scongelamento, sono stati centrifugati e diluiti con una soluzione di acido formico in acqua contenente la miscela degli standard interni secondo un rapporto 1:3; 2) la ....